В чистых помещениях существует два основных источника загрязнения: частицы и микроорганизмы, которые могут быть вызваны человеческим фактором, окружающей средой или сопутствующими процессами. Несмотря на все усилия, загрязнения всё равно проникают в чистые помещения. К распространённым переносчикам загрязнений относятся человеческие клетки (клетки, волосы), факторы окружающей среды, такие как пыль, дым, туман, или оборудование (лабораторное оборудование, уборочный инвентарь), а также неправильные методы протирания и уборки.
Наиболее распространенным носителем загрязнения являются люди. Даже при использовании самой строгой спецодежды и самых строгих рабочих процедур, неквалифицированные операторы представляют наибольшую угрозу загрязнения в чистых помещениях. Сотрудники, не соблюдающие правила эксплуатации чистых помещений, представляют собой фактор высокого риска. Стоит одному сотруднику допустить ошибку или забыть какой-либо этап, как это приведет к загрязнению всего чистого помещения. Компания может гарантировать чистоту чистого помещения только путем постоянного мониторинга и регулярного обновления программ обучения с нулевым уровнем загрязнения.
Другими основными источниками загрязнения являются инструменты и оборудование. Если тележку или машину лишь грубо протереть перед тем, как занести в чистую комнату, они могут занести микроорганизмы. Часто рабочие не знают, что колесное оборудование катится по загрязненным поверхностям, когда его ввозят в чистую комнату. Поверхности (включая полы, стены, оборудование и т. д.) регулярно проверяются на жизнеспособность с помощью специально разработанных контактных пластин, содержащих питательные среды, такие как триптиказо-соевый агар (TSA) и декстрозный агар Сабуро (SDA). TSA — это питательная среда, предназначенная для бактерий, а SDA — это питательная среда, предназначенная для плесневых грибов и дрожжей. TSA и SDA обычно инкубируют при разных температурах, при этом TSA подвергают воздействию температур в диапазоне 30–35 °C, что является оптимальной температурой роста для большинства бактерий. Диапазон 20–25 °C является оптимальным для большинства видов плесневых грибов и дрожжей.
Когда-то воздушный поток был распространённой причиной загрязнения, но современные системы HVAC для чистых помещений практически полностью исключили его. Качество воздуха в чистых помещениях контролируется и регулярно (например, ежедневно, еженедельно, ежеквартально) контролируется на предмет наличия частиц, жизнеспособных микроорганизмов, температуры и влажности. HEPA-фильтры используются для контроля количества частиц в воздухе и способны задерживать частицы размером до 0,2 мкм. Эти фильтры обычно работают непрерывно с калиброванной скоростью потока для поддержания качества воздуха в помещении. Влажность обычно поддерживается на низком уровне, чтобы предотвратить распространение микроорганизмов, таких как бактерии и плесень, предпочитающих влажную среду.
Фактически, самым высоким и распространенным источником загрязнения в чистых помещениях является оператор.
Источники и пути проникновения загрязнения существенно не различаются в зависимости от отрасли, однако существуют различия в допустимых и недопустимых уровнях загрязнения. Например, производителям таблеток для приема внутрь не требуется поддерживать тот же уровень чистоты, что и производителям инъекционных препаратов, которые вводятся непосредственно в организм человека.
Производители фармацевтической продукции менее толерантны к микробному загрязнению, чем производители высокотехнологичной электроники. Производители полупроводников, выпускающие микроскопические продукты, не могут допустить загрязнения какими-либо частицами для обеспечения функциональности продукта. Поэтому эти компании заботятся только о стерильности имплантируемого в организм человека продукта и функциональности чипа или мобильного телефона. Плесень, грибки и другие формы микробного загрязнения в чистых помещениях их беспокоят относительно меньше. С другой стороны, фармацевтические компании обеспокоены всеми живыми и неживыми источниками загрязнения.
Фармацевтическая промышленность регулируется Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) и должна строго соблюдать правила надлежащей производственной практики (GMP), поскольку последствия загрязнения в фармацевтической отрасли крайне пагубны. Производители лекарств должны не только гарантировать отсутствие бактерий в своей продукции, но и вести документацию и отслеживать все процессы. Компания, производящая высокотехнологичное оборудование, может поставлять ноутбуки или телевизоры, если они прошли внутренний аудит. Но в фармацевтической отрасли всё не так просто, поэтому для компании крайне важно иметь, использовать и документировать процедуры работы в чистых помещениях. Из-за финансовых соображений многие компании нанимают внешние профессиональные клининговые компании для выполнения клининговых услуг.
Комплексная программа испытаний чистого помещения должна включать в себя анализ видимых и невидимых частиц в воздухе. Хотя не требуется, чтобы все загрязнители в этих контролируемых помещениях были идентифицированы микроорганизмами, программа контроля среды должна включать соответствующий уровень бактериальной идентификации извлеченных образцов. В настоящее время существует множество методов бактериальной идентификации.
Первым этапом идентификации бактерий, особенно при изоляции образцов в чистых помещениях, является окрашивание по Граму, поскольку оно может дать интерпретационные подсказки об источнике микробного загрязнения. Если при выделении и идентификации микроорганизмов обнаружены грамположительные кокки, источником загрязнения мог быть человек. Если при выделении и идентификации микроорганизмов обнаружены грамположительные палочки, источником загрязнения могла быть пыль или штаммы, устойчивые к дезинфицирующим средствам. Если при выделении и идентификации микроорганизмов обнаружены грамотрицательные палочки, источником загрязнения могла быть вода или любая влажная поверхность.
Микробная идентификация в фармацевтических чистых помещениях крайне важна, поскольку она связана со многими аспектами обеспечения качества, такими как биопробы в производственных условиях; бактериальная идентификация готовой продукции; выявление неназванных организмов в стерильных продуктах и воде; контроль качества технологий ферментационного хранения в биотехнологической промышленности; и микробиологическая верификация в процессе валидации. Метод FDA, подтверждающий способность бактерий выживать в определённой среде, будет получать всё большее распространение. Если уровень микробного загрязнения превышает установленный уровень или результаты испытаний на стерильность указывают на наличие загрязнения, необходимо проверить эффективность моющих и дезинфицирующих средств и исключить выявленные источники загрязнения.
Существует два метода мониторинга поверхностей в чистых помещениях:
1. Контактные пластины
Эти специальные чашки Петри содержат стерильную питательную среду, уровень которой должен быть выше края чашки Петри. Контактная пластина покрывает поверхность, с которой собирается образец, и любые микроорганизмы, видимые на поверхности, прилипают к поверхности агара и инкубируются. Этот метод позволяет определить количество микроорганизмов, видимых на поверхности.
2. Метод тампона
Он стерилен и хранится в подходящей стерильной жидкости. Тампон наносится на исследуемую поверхность, и микроорганизм идентифицируется путем его извлечения из питательной среды. Тампоны часто используются на неровных поверхностях или в местах, где сложно получить образец контактной пластиной. Взятие тампона — это скорее качественный тест.
Время публикации: 21 октября 2024 г.