В чистых помещениях существует два основных источника загрязнения: частицы и микроорганизмы, которые могут быть вызваны человеческим фактором, факторами окружающей среды или связанными с ними процессами. Несмотря на все усилия, загрязнение все равно будет проникать в чистое помещение. К распространенным переносчикам загрязнения относятся: человеческие тела (клетки, волосы), факторы окружающей среды, такие как пыль, дым, туман или оборудование (лабораторное оборудование, уборочное оборудование), а также неправильные методы протирки и очистки.
Наиболее распространенным переносчиком загрязнения являются люди. Даже при использовании самой строгой одежды и соблюдении самых строгих правил работы, наибольшую угрозу загрязнения в чистом помещении представляют неквалифицированные операторы. Сотрудники, не соблюдающие правила работы в чистом помещении, представляют собой фактор высокого риска. Даже одна ошибка или пропуск одного сотрудника может привести к загрязнению всего чистого помещения. Компания может обеспечить чистоту чистого помещения только путем постоянного мониторинга и непрерывного повышения квалификации персонала с нулевым уровнем загрязнения.
Другие основные источники загрязнения — это инструменты и оборудование. Если тележку или станок протирают лишь поверхностно перед входом в чистое помещение, это может привести к попаданию микроорганизмов. Часто работники не знают, что оборудование на колесах перекатывается по загрязненным поверхностям, когда его завозят в чистое помещение. Поверхности (включая полы, стены, оборудование и т. д.) регулярно проверяют на наличие жизнеспособных микроорганизмов с помощью специально разработанных контактных чашек Петри, содержащих питательные среды, такие как триптиказо-соевый агар (TSA) и агар Сабуро с декстрозой (SDA). TSA — это питательная среда, предназначенная для бактерий, а SDA — для плесени и дрожжей. TSA и SDA обычно инкубируют при разных температурах, при этом TSA подвергается воздействию температур в диапазоне 30-35˚C, что является оптимальной температурой для роста большинства бактерий. Диапазон 20-25˚C является оптимальным для большинства видов плесени и дрожжей.
Раньше одной из распространенных причин загрязнения воздуха была циркуляция воздуха, но современные системы вентиляции и кондиционирования воздуха в чистых помещениях практически полностью исключили загрязнение воздуха. Воздух в чистом помещении контролируется и отслеживается регулярно (например, ежедневно, еженедельно, ежеквартально) на предмет количества частиц, жизнеспособных микроорганизмов, температуры и влажности. Для контроля количества частиц в воздухе используются HEPA-фильтры, способные отфильтровывать частицы размером до 0,2 мкм. Эти фильтры обычно работают непрерывно с откалиброванной скоростью потока для поддержания качества воздуха в помещении. Влажность обычно поддерживается на низком уровне, чтобы предотвратить размножение микроорганизмов, таких как бактерии и плесень, которые предпочитают влажную среду.
Фактически, наиболее распространенным и значимым источником загрязнения в чистых помещениях является оператор.
Источники и пути проникновения загрязнения существенно не различаются от отрасли к отрасли, однако существуют различия между отраслями с точки зрения допустимых и недопустимых уровней загрязнения. Например, производителям таблеток для приема внутрь не требуется поддерживать тот же уровень чистоты, что и производителям инъекционных препаратов, которые вводятся непосредственно в организм человека.
Фармацевтические производители менее терпимы к микробному загрязнению, чем производители высокотехнологичной электроники. Производители полупроводников, выпускающие микроскопические изделия, не могут допустить никакого загрязнения частицами для обеспечения функциональности продукта. Поэтому эти компании заботятся только о стерильности продукта, предназначенного для имплантации в человеческий организм, и о функциональности чипа или мобильного телефона. Они относительно меньше обеспокоены плесенью, грибками или другими формами микробного загрязнения в чистых помещениях. С другой стороны, фармацевтические компании обеспокоены всеми живыми и мертвыми источниками загрязнения.
Фармацевтическая промышленность регулируется FDA и должна строго соблюдать правила надлежащей производственной практики (GMP), поскольку последствия загрязнения в фармацевтической отрасли очень опасны. Производители лекарств должны не только гарантировать отсутствие бактерий в своей продукции, но и вести документацию и отслеживать все процессы. Компания, производящая высокотехнологичное оборудование, может отправить ноутбук или телевизор, если они пройдут внутренний аудит. Но для фармацевтической промышленности все не так просто, поэтому для компании крайне важно иметь, использовать и документировать процедуры работы в чистых помещениях. Из-за соображений экономии многие компании нанимают сторонние профессиональные клининговые компании для проведения уборки.
Комплексная программа экологического контроля чистых помещений должна включать видимые и невидимые частицы, находящиеся в воздухе. Хотя нет требования, чтобы все загрязняющие вещества в этих контролируемых средах были идентифицированы с помощью микроорганизмов, программа экологического контроля должна включать соответствующий уровень бактериологической идентификации образцов. В настоящее время существует множество методов бактериологической идентификации.
Первым шагом в идентификации бактерий, особенно в условиях изоляции чистых помещений, является метод окрашивания по Граму, поскольку он может дать подсказки относительно источника микробного загрязнения. Если при выделении и идентификации микроорганизмов обнаруживаются грамположительные кокки, загрязнение могло произойти от человека. Если при выделении и идентификации микроорганизмов обнаруживаются грамположительные палочки, загрязнение могло произойти от пыли или штаммов, устойчивых к дезинфицирующим средствам. Если при выделении и идентификации микроорганизмов обнаруживаются грамотрицательные палочки, источником загрязнения могла быть вода или любая влажная поверхность.
Идентификация микроорганизмов в фармацевтических чистых помещениях крайне необходима, поскольку она связана со многими аспектами обеспечения качества, такими как биотестирование в производственных условиях; идентификация бактерий в конечной продукции; выявление неустановленных организмов в стерильных продуктах и воде; контроль качества технологий ферментационного хранения в биотехнологической промышленности; и проверка результатов микробиологических исследований в процессе валидации. Метод FDA по подтверждению способности бактерий выживать в определенной среде будет становиться все более распространенным. Когда уровень микробного загрязнения превышает установленный уровень или результаты теста на стерильность указывают на загрязнение, необходимо проверить эффективность чистящих и дезинфицирующих средств и исключить выявление источников загрязнения.
Существует два метода мониторинга поверхностей в чистых помещениях:
1. Контактные пластины
Эти специальные чашки Петри содержат стерильную питательную среду, которая готовится таким образом, чтобы ее уровень был выше края чашки. Крышка контактной чашки закрывает поверхность, с которой будет взят образец, и любые микроорганизмы, видимые на поверхности, прилипнут к агаровой среде и начнут инкубироваться. Этот метод позволяет определить количество микроорганизмов, видимых на поверхности.
2. Метод мазка
Этот материал стерилен и хранится в подходящей стерильной жидкости. Тампон наносится на исследуемую поверхность, а микроорганизм идентифицируется путем извлечения тампона из среды. Тампоны часто используются на неровных поверхностях или в местах, где трудно взять образец с помощью контактной чашки Петри. Отбор проб с помощью тампона — это скорее качественный тест.
Дата публикации: 21 октября 2024 г.