1. Цель: Целью данной процедуры является обеспечение стандартизированной процедуры асептических операций и защиты стерильных помещений.
2. Область применения: лаборатория биологических испытаний.
3. Ответственное лицо: инспектор контроля качества, тестер.
4. Определение: нет
5. Меры предосторожности
Строго выполнять асептические операции для предотвращения микробной контаминации;операторы должны выключать УФ-лампу перед входом в стерильное помещение.
6.Процедуры
6.1.Стерильное помещение должно быть оборудовано стерильной операционной и буферной комнатой.Чистота стерильной операционной должна достигать класса 10000. Температура в помещении должна поддерживаться на уровне 20-24°С, влажность - 45-60%.Чистота чистого бокса должна достигать 100 класса.
6.2.Стерильное помещение должно содержаться в чистоте, категорически запрещается скапливать мусор во избежание загрязнения.
6.3.Строго предотвращайте загрязнение всего стерилизационного оборудования и питательных сред.Те, кто заражен, должны прекратить их использование.
6.4.Стерильная комната должна быть оборудована дезинфицирующими средствами рабочей концентрации, например, 5% раствором крезола, 70% спиртом, 0,1% раствором хлорметионина и др.
6.5.Стерильное помещение следует регулярно стерилизовать и очищать соответствующими дезинфицирующими средствами, чтобы чистота стерильного помещения соответствовала требованиям.
6.6.Все инструменты, инструменты, посуда и другие предметы, которые необходимо внести в стерильное помещение, должны быть плотно упакованы и простерилизованы соответствующими методами.
6.7.Перед входом в стерильное помещение персонал должен вымыть руки с мылом или дезинфицирующим средством, а затем перед входом в стерильное помещение переодеться в специальную рабочую одежду, обувь, шапки, маски и перчатки (или еще раз протереть руки 70% этанолом).Выполнение операций в бактериальной камере.
6.8.Перед использованием стерильной комнаты ультрафиолетовая лампа в стерильной комнате должна быть включена для облучения и стерилизации более чем на 30 минут, и одновременно с этим должен быть включен чистый стол для продувки воздухом.После завершения операции стерильное помещение следует своевременно очистить, а затем простерилизовать ультрафиолетом в течение 20 минут.
6.9.Перед проверкой внешняя упаковка испытуемого образца должна быть сохранена неповрежденной и не должна открываться во избежание загрязнения.Перед проверкой продезинфицируйте внешнюю поверхность ватными тампонами, содержащими 70% спирта.
6.10.Во время каждой операции следует проводить отрицательный контроль для проверки надежности асептической операции.
6.11.При впитывании бактериальной жидкости необходимо использовать присоску для ее поглощения.Не прикасайтесь к соломинке прямо ртом.
6.12.Иглу для прививки необходимо стерилизовать пламенем до и после каждого использования.После охлаждения культуру можно инокулировать.
6.13.Соломинки, пробирки, чашки Петри и другую посуду, содержащую бактериальную жидкость, следует замочить в стерилизационном ведре, содержащем 5% раствор лизола для дезинфекции, а затем вынуть и промыть через 24 часа.
6.14.Если на стол или пол пролилась бактериальная жидкость, следует немедленно полить загрязненный участок 5% раствором карболовой кислоты или 3% лизолом на время не менее 30 минут, прежде чем обработать его.При загрязнении рабочей одежды и головных уборов бактериальной жидкостью их следует немедленно снять и постирать после стерилизации паром под высоким давлением.
6.15.Все предметы, содержащие живые бактерии, перед ополаскиванием под краном необходимо дезинфицировать.Категорически запрещается загрязнять канализацию.
6.16.Количество колоний в стерильном помещении следует проверять ежемесячно.Открыв чистый бокс, возьмите несколько стерильных чашек Петри с внутренним диаметром 90 мм и в асептических условиях введите около 15 мл питательной агаровой питательной среды, расплавленной и охлажденной примерно до 45°С.После затвердевания поместите его вверх дном при температуре от 30 до 35 градусов. Инкубируйте в течение 48 часов в инкубаторе при температуре ℃.Доказав стерильность, возьмите от 3 до 5 чашек и поместите их слева, посередине и справа от рабочего положения.После открытия крышки и выдержки в течение 30 минут поместите их вверх дном в инкубатор при температуре от 30 до 35°C на 48 часов и выньте.исследовать.Среднее количество различных бактерий на чашке в чистом помещении класса 100 не должно превышать 1 колонии, а среднее количество в чистом помещении класса 10000 не должно превышать 3 колоний.При превышении лимита стерильное помещение следует тщательно дезинфицировать до тех пор, пока повторные проверки не будут соответствовать требованиям.
7. См. главу (Метод проверки на стерильность) в разделах «Методы гигиенического контроля лекарственных средств» и «Китайские стандартные методы проверки лекарственных средств».
8. Отдел дистрибуции: Отдел управления качеством.
Техническое руководство по чистым помещениям:
После получения стерильной среды и стерильных материалов мы должны поддерживать стерильное состояние, чтобы изучать конкретный известный микроорганизм или использовать его функции.В противном случае туда легко могут проникнуть различные микроорганизмы извне. Явление смешения ненужных микроорганизмов извне в микробиологии называется контаминирующими бактериями.Предотвращение контаминации является важнейшим методом микробиологической работы.Полная стерилизация, с одной стороны, и предотвращение контаминации, с другой, являются двумя аспектами асептической техники.Кроме того, мы должны предотвратить выход изучаемых микроорганизмов, особенно патогенных микроорганизмов или генно-инженерных микроорганизмов, не существующих в природе, из наших экспериментальных контейнеров во внешнюю среду.Для этих целей в микробиологии существует множество мероприятий.
Стерильная комната – это обычно небольшая комната, специально оборудованная в микробиологической лаборатории.Можно построить из листов и стекла.Площадь не должна быть слишком большой, около 4-5 квадратных метров, а высота – около 2,5 метров.Буферная комната должна быть оборудована вне стерильной комнаты.Дверь буферной комнаты и дверь стерильной комнаты не должны смотреть в одном направлении, чтобы поток воздуха не заносил различные бактерии.И стерильная комната, и буферная комната должны быть герметичными.Вентиляционное оборудование помещений должно иметь устройства фильтрации воздуха.Пол и стены стерильного помещения должны быть гладкими, не допускающими загрязнения и легко поддающимися чистке.Рабочая поверхность должна быть ровной.И стерильная комната, и буферная комната оборудованы ультрафиолетовым освещением.Ультрафиолетовое освещение в стерильном помещении находится на расстоянии 1 метра от рабочей поверхности.Персонал, входящий в стерильное помещение, должен носить стерилизованную одежду и головные уборы.
В настоящее время стерильные помещения в основном существуют на микробиологических заводах, а в лабораториях общего назначения используются чистые боксы.Основная функция чистого стола заключается в использовании устройства с ламинарным потоком воздуха для удаления с рабочей поверхности различной мельчайшей пыли, включая микроорганизмы.Электрическое устройство позволяет воздуху проходить через фильтр HEPA, а затем поступать на рабочую поверхность, так что рабочая поверхность всегда находится под контролем потока стерильного воздуха.Кроме того, на стороне, близкой к внешней стороне, имеется высокоскоростная воздушная завеса, предотвращающая попадание наружного бактериального воздуха.
В местах со сложными условиями вместо чистого стола также можно использовать деревянные стерильные ящики.Стерильная коробка имеет простую конструкцию и ее легко перемещать.В передней части ящика имеются два отверстия, которые в нерабочем состоянии закрываются двухтактными дверцами.Вы можете вытянуть руки во время работы.Верхняя часть фасада оснащена стеклом для облегчения внутренней работы.Внутри ящика находится ультрафиолетовая лампа, а посуду и бактерии можно занести через небольшую дверцу сбоку.
Асептические методы работы в настоящее время не только играют решающую роль в микробиологических исследованиях и применениях, но также широко используются во многих биотехнологиях.Например, трансгенная технология, технология моноклональных антител и т. д.
Время публикации: 6 марта 2024 г.